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本生淺談:ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中常見問題及解決方法
更新時(shí)間:2026-02-04瀏覽:265次

  本生淺談:elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)中常見問題及解決方法

  、挑選試劑

  挑選質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑闡明書進(jìn)行操作,操作將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。

  二、加樣

  或許原因:

  1)血清或血漿標(biāo)本別離欠好即進(jìn)行加樣;

  2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱等待時(shí)刻過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí));

  3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺起孔外。

  解決辦法:

  1)  標(biāo)本為血清:將血液先自然寄存1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:有必要運(yùn)用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后有必要立即顛倒采血管混合5-10次,放置段時(shí)刻后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要儲(chǔ)存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。

  2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。

  3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板外表輕拭吸干。

  4) 假如采用AT或其他全自動(dòng)加樣,挑選FAME或其他后處理儀器加酶試劑。

  5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。

  三、 孵育

  或許原因:

  1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸騰,吸附于孔壁,難于清洗;

  2) 孵育時(shí)刻人為延伸,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗。

  解決辦法:

  1) 貼封片或加蓋;

  2) 按闡明過程嚴(yán)格控制操作時(shí)刻。

  注:供科研使用,以上資料供參考,不作為實(shí)驗(yàn)依據(jù),具體請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或品牌商。

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